PCR анализа: Што е тоа? Како да се земе на PCR анализа

Не толку одамна развиена сигурен, високо чувствителни и брзиот метод за дијагностицирање на разни заразни болести кај луѓето. Таков метод е наречен "PCR анализа". Што е тоа, она што е неговата суштина, она што тој може да се идентификуваат микроорганизми и како да го земе, ќе бидат опишани во овој напис.

Историја на откривање

Измислен полимераза верижна реакција (PCR) е американски научник Keri Myullis во 1983. Првично, патентиран метод за дијагностицирање на "Кит корпорација", во која тој работел и неговиот творец. Но, во 1992 година беа продадени сите права и патентите на фирмата "Хофман-Ла Рош". После тоа, се покажа дека слични студии се врши паралелно и се пријавени од страна на други американски биолози, како што Elis Чен, Дејвид Едгар, Џон RRE. Во 1980 година тој се занимава со ова прашање и советските научници Slyusarenko А. А. Kaledin и С. Gorodetsky. Затоа, за да се утврди сопственикот на авторските права единствен не е можно. Многу извонредни биохемичари да придонесе за развојот на методите за реакција на полимераза и ЦЕРН патентиран нивните иновации. Во овој момент анализа на PCR се врши во текот на специјално опремени лаборатории.

РЕЗИМЕ PCR дијагностички

PCR анализа: Што е тоа и како тоа функционира? Суштината на методот лежи во фактот дека со користење на посебен ензим ДНК полимераза in vitro да се зголеми во обем специфични микробиолошки средина. За да го направите ова постојано се размножуваат достапни ДНК материјал. Така, присуството на патоген во примерок сумата ќе се зголеми на сметка на биохемиска лабораторија манипулација, бактерии и нема да биде тешко да се открие во микроскоп.

Како е студија на материјалот?

За извршување на анализа се бара:

• дефиниција ДНК;
• прајмери материјал поврзување на краевите на фрагмент;
• thermostable ДНК полимераза ензим;
• хемикалии, се обезбеди правилно функционирање на ензимите;
• се бара тампон решение за создавање на соодветни услови за раст и развој на ДНК материјал.

За извршување на PCR работат 25-30 повторувања се состои од три чекори: денатурација, annealing и издолжување.

Да се анализира polimezarnoy верижна реакција со користење на посебен уред - колоездач. Современа опрема ви овозможува да инсталирате потребните греење и ладење цевки програма за елиминирање на грешки за време на дијагнозата.

Каде се аплицира дијагнозата?

метод верижна реакција Polimezarnoy се користат во различни области на медицината:

• Судска го користат за да се идентификуваат генетскиот материјал, како на пример коса, плунка или крв;
• PCR анализа на крвта помага да се генотипизирање, на пример, за откривање на индивидуалните генетски засадени одговор на специфични дрога;
• со методот утврден семејни врски меѓу луѓето;
• најбараните PCR метод стана во медицинска дијагноза за утврдување на разни заразни болести.

Што инфекции открива PCR?

Така, медицина долго време успешно се користи PCR анализа. Што е тоа, ние веќе ја научи. И некои патогени може да се открие со него? PCR дијагностициран следниве инфекции :

• хепатитис А, B, C;
• ureaplasmosis;
• кандидијаза;
• кламидија;
• mycoplasmosis;
• бактериска вагиноза;
• инфективна мононуклеоза;
• трихомонијаза;
• ХПВ инфекција;
• туберкулоза;
• херпес инфекција на 1-ви и 2-ри тип;
• Helicobacter pylori инфекција;
• цитомегаловирус;
• дифтерија;
• салмонелоза;
• ХИВ инфекција.

Исто така, PCR методи се користат во дијагнозата на рак.

предности на методот

Дијагностички PCR има неколку предности:

1. Висока чувствителност. Дури и со само неколку ДНК молекули микроорганизам PCR анализа одредува присуството на инфекција. Тоа им помага на метод за хронични и латентна болести кои се појавуваат. Често во вакви случаи, микроорганизмот е необработено на други начини.
2. Со цел да се испита кој било соодветен материјал, како што плунка, крв, сексуалната селекција, коса, епителните клетки. Од најчестите е тест на крвта и урогениталниот брис PCR.

3. Нема потреба од продолжен расте култури. На автоматизиран процес на дијагностика овозможува да се добие резултатите од студијата после 4-5 часа.
4. Методот е речиси целосно автентични. Евидентирани само изолирани случаи на лажно негативен резултат.
5. Способноста да се идентификуваат неколку видови на патогени во еден примерок материјал. Ова не само што го забрзува процесот на дијагностицирање на болеста, но, исто така, значително го намалува материјалните трошоци. Често, лекарот ви препише сеопфатна анализа на PCR. Истражувањето цена, која се состои од утврдување на шест патогени, е околу 1.500 рубли.

Препораки за подготовка за анализа

Резултатите да бидат валидни студиите PCR треба да бидат тестирани, според препораките на прелиминарните подготовки за дијагноза:

1. Пред доставување на плунка треба да се воздржат од јадење и лек за 4 часа пред земање на материјал. Непосредно пред постапката, исплакнете ја устата со зовриена вода.
2. Горенаведените правила мора да се раководи и при земањето на примерокот од внатрешноста на образот. По испирање се препорачува да се изврши светлина масажа на кожата да се ослободи простатата секрет.
3. Урината најчесто се собира во вашиот дом. За да го направите ова, ќе треба да се спроведе темелна тоалетот на гениталиите. Во стерилна пластичен сад е потребно да се соберат 50-60 мл урина. Се препорачува за жени да вметнете тампонот во вагината, а мажите колку што е можно да се повлече на кожата пати за да се обезбеди чистотата на материјалот. Вие не може да се земе материјал за време на менструацијата.
4. За испорака на сперма да апстинираат од сексуални односи во текот на 3 дена пред собирањето на материјалот. Исто така, лекарите се препорачува да се откаже од употреба на сауна и топла бања, алкохол и зачинета храна. За 3 часа пред анализата е да се воздржат од мокрење.
5. Да помине на урогениталниот тест, на пример, ако анализата на кламидија PCR, и мажите и жените се препорачува дека сексуалното одмор за 3 дена. 2 недели пред анализа не може да се земе антибиотици. За една недела треба да се престане со користење на интимни гелови, масти, вагитории, Douching. 3 часа пред студијата треба да се воздржат од мокрење. За време на менструацијата ограда материјал не се врши, само 3 дена по престанокот на дамки може да се урогениталниот тест.

PCR за време на бременоста

Периодот на чекање за бебето, многу заразни болести, сексуално преносливи болести, се исклучително опасни за нормален развој на фетусот. Полово преносливи болести можат да предизвикаат интраутериниот развој, спонтан абортус или предвремено породување, конгенитални малформации на детето. Затоа, тоа е важно да се добие во почетокот на бременоста скрининг PCR. Поминете анализа е неопходна при регистрацијата - до 12 недели.

Ограда материјал доаѓа од цервикалниот канал со посебни четки. Постапката е безболна и не претставува опасност за бебето. Нормално во текот на анализираниот за методот Chlamydia PCR, како и ureaplasmosis, mycoplasmosis, цитомегаловирус, херпес, папилома вирус на бременоста. Таквиот преглед комплекс наречен PCR 6.

PCR за дијагноза на ХИВ

Се должи на фактот дека начинот на полимераза верижна реакција е многу чувствителна на промени во телото и условите за дијагноза, многу фактори може да влијаат на исходот. Затоа PCR анализа за ХИВ инфекција не е сигурен метод, неговата ефикасност - 96-98%. Останатите 24% од тестот дава лажни позитивни резултати.

Но, во некои ситуации, без PCR дијагноза на ХИВ не може да го направи. Обично, тоа се врши на луѓето со лажни-негативни ELISA. Овие бројки укажуваат дека лицето се уште не е развиена антитела на вирусот, а не може да се открие без зголемување на бројот на повеќе. Дека ова може да се постигне со спроведување на тест на крвта PCR метод.

Исто така, потребно е дијагноза на децата првата година од животот, роден на ХИВ-позитивни мајки. Методот е единствениот начин со сигурност да се утврди статусот на детето.

PCR за дијагноза на хепатитис

метод верижна реакција на полимераза овозможува откривање на ДНК на вирусот на хепатитис А, B, C, и пред формирањето на антитела на почетокот на инфекција или симптом. Особено ефикасна е PCR анализа на хепатитис Ц, бидејќи 85% од таква болест се асимптоматски и без навремено лекување станува хронична.

Навремено откривање на патогенот ќе помогне да се избегнат компликации и долгорочен третман.

Интегрирано PCR скрининг

Сеопфатна PCR Анализа: Што е тоа? Ова скрининг метод polimezarnoy верижна реакција која вклучува одредување истовремено неколку видови инфекции: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, кандида, трихомонас, цитомегаловирус, Ureaplasma urealitikum, херпес 1-ви и 2-ри тип, гонореја папилома вирус. Цената на оваа дијагноза се движи од 2.000 до 3.500 рубли. во зависност од клиниката, материјали и опрема, како и од видот на анализа: квалитативниот или квантитативниот. Она што е потребно во вашиот случај - на лекар одлучува. Во некои случаи, можете едноставно да детектира присуство на патоген во други, како што се ХИВ, важната улога од страна на квантитативните титарот. се нарекува "PCR анализа на 12" во дијагнозата на сите од горенаведените испитување патогени.

Дешифрирање резултатите од анализата

Транскрипција PCR анализа е јасна. Има само 2 скала со индекс - ". Негативни" "позитивна" и По откривање на патогени може лекари со 99% доверба -th потврди присуството на болеста и да се започне лекување на пациентот. Во квантитативен метод за одредување на инфекција во соодветната колона индекс бројот на откриени бактерии ќе бидат утврдени. Само лекар може да се утврди степенот на болеста и ја пропише потребната терапија.

Во некои случаи, на пример во одредувањето на ХИВ инфекција со PCR, со негативен резултат на тоа, постои потреба за дополнителни истражувања за да се потврди овие бројки.

Каде да се тестираат?

Каде помине-PCR анализа во јавниот клиника или приватна лабораторија? За жал, во здравствените установи опрема и методи на општината се често застарена. Затоа е подобро да се даде предност на приватни лаборатории со модерна опрема и високо квалификуван персонал. Покрај тоа, во една приватна клиника ќе го добиете резултати многу побрзо.

Во Москва, многу приватни лаборатории нудат PCR анализа за различни инфекции. На пример, во такви клиники "Вита", "Интегрирано клиника", "Среќно семејство", "Уро-Про", што се врши PCR анализа. Анкета цена е 200 рубли. за утврдување на патоген.

Тоа може да се заклучи дека дијагноза на заразни болести на PCR во повеќето случаи е брз и сигурен начин за откривање на патогени во телото во раните фази на инфекција. Сепак, во одредени случаи, да изберете и други методи за дијагностицирање. Се утврди потребата за една ваква студија може да биде само специјалист. PCR анализа Дешифрирање исто така, бара професионален пристап. Следете ги советите на лекарот и не даваат свои тестови, кои не се потребни.